Bravo-Guerrero et al
3 Rev. Vet. Zootec. Amaz. 4(2): e759; (Jul-Dic, 2024). e-ISSN: 2810-8175
La caracterización del extracto de las hojas se realizó mediante varios análisis. Para determinar el pH, se
utilizó un medidor electrométrico de pH marca DAKTON PH510®, siguiendo el método potenciométrico
con una celda electroquímica (NTE INEN 1087). La densidad se determinó mediante el método de
picnometría, que compara el peso de los picnómetros vacíos, llenos de agua y llenos con la muestra (10). El
índice de refracción se midió utilizando un refractómetro marca ATÁGO®, siguiendo el procedimiento
descrito por Vizoso Gutiérrez (11).
El porcentaje de ácido oleico se determinó mediante un método volumétrico, utilizando una solución
estandarizada de hidróxido de sodio y fenolftaleína como indicador de reacción ácido-base, basado en las
directrices de la INEN (2013). Finalmente, la concentración de fenoles se determinó mediante
espectrofotometría UV-visible con un espectrofotómetro THERMO-SCIENTE 20D®, utilizando el método
de Folin-Ciocalteu y ácido gálico como material de referencia (12).
2.2. Identificación y recolección de garrapatas en fase adulta en bovinos infestados
Se identificaron bovinos infestados de garrapatas en fase adulta procedentes del hato bovino de la ESPAM-
MFL. Una vez inmovilizados en la manga o embudo del establo, se procedió a extraer los ectoparásitos de
forma manual, con el uso de guantes y con medidas preventivas para evitar daños en las estructuras de las
garrapatas, la totalidad de los especímenes fueron de 320 garrapatas que fueron colocadas en un recipiente
de vidrio adecuado para su traslado en un lapso de cinco minutos hasta el Laboratorio de Química, ubicado
en la Carrera de Medicina Veterinaria de la ESPAM-MFL.
2.3 Prueba in vitro
Las concentraciones de 4.1, 4.24 y 4.3 % de los extractos de hojas de piñón fueron aplicados en 16 cajas
petri constituidas por 20 garrapatas como unidad experimental, donde se formaron grupos homogéneos
por tratamientos y repeticiones. Además, se llevó a cabo la realización de la Prueba de Inmersión de Adultos
(AIT), conocida en inglés como el "Adult Inmersion Test" (AIT), según lo descrito por Lopera et al (13). Este
procedimiento consiste en sumergir grupos de garrapatas en cada uno de los tratamientos mencionados a
los que se depositó 3 ml de la dilución de los extractos, durante un período de 10 minutos. Posteriormente,
las soluciones con las garrapatas fueron suavemente agitadas y después de la inmersión, las garrapatas
fueron retiradas, secadas con papel absorbente y devueltas a sus respectivas cajas de Petri. Estas cajas,
cubiertas previamente para evitar la fuga de los individuos, fueron rotuladas y colocadas en una incubadora
a una temperatura de 28 a 30°C y humedad relativa de 72 a 80%.
La lectura de mortalidad y sobrevivencia de las garrapatas se realizó a los 24, 48, 72 y 96 h. Se consideraron
como garrapatas muertas, aquellas que presentaron ausencia de movimientos en sus extremidades y una
tonalidad diferente. Se llevó a cabo observaciones periódicas y se realizaron seguimiento de los datos; hasta
el punto de poder calcular la eficacia de los extractos naturales en la supervivencia y mortalidad de las
garrapatas (14).
2.4 Diseño experimental y análisis estadístico
Se evaluaron diversas variables relacionadas con la caracterización de los parámetros fisicoquímicos de los
extractos de Jatropha curcas, incluyendo pH, densidad, índice de refracción, acidez y concentración de
fenoles totales. Paralelamente, se llevó a cabo un seguimiento de la mortalidad y supervivencia de las
garrapatas durante un período de 24, 48, 72 y 96 horas. Los tratamientos utilizados fueron los siguientes:
T0 (Testigo): Amitraz al 20.8%; T1: Extracto de las hojas de Jatropha curcas (piñón) al 4.1% de
concentración; T2: 4.24% y T3: 4.3%.
Para esta investigación se utilizó un Diseño Completamente al Azar (DCA) con un total de los 4
tratamientos, con cuatro repeticiones, el modelo matemático es el siguiente: YIJ=M+TI+EIJ
Los datos se registraron en el software Microsoft Excel (2016), el análisis estadístico se realizó en el
paquete InfoStat 2020, se efectuó los supuestos de ANOVA (normalidad y homogeneidad de varianza); para